Amplificação de Sinal Baseada em Montagem de Pinça Catalítica Concatenada/ Reação de Hibridização Hiperramificada Sem Enzima para a Detecção Fotoeletroquímica Sensível do RNA da Telomerase Humana

O RNA da telomerase humana (hTR), um importante biomarcador para o diagnóstico do câncer, é o molde para a síntese de repetições de DNA telomérico e foi encontrado com uma expressão 7 vezes maior em células tumorais. Aqui, apresentamos um biossensor fotoeletroquímico (PEC) para a detecção de hTR, acoplado a uma nova estratégia de amplificação baseada em cascatas de montagem de pinça catalítica (CHA) e reação de hibridização hiperramificada (HB-HCR). Na superfície do eletrodo, as sondas de pinça 1 tioladas foram imobilizadas em nanopartículas de CdS depositadas por meio de uma ligação Cd–S. Na presença do hTR-alvo, uma reação CHA foi desencadeada e a exposição do trigger1 poderia ainda iniciar uma reação HB-HCR para formar abundantes DNAse com hemina/G-quádruplex contendo uma estrutura de DNA dendrítico. A precipitação catalítica das DNAse de 4-cloro-1-naftol (4-CN) por H2O2 ocorreu subsequentemente na superfície do eletrodo PEC e suprimiu eficientemente a saída de fotocorrente. Portanto, a mudança na resposta de fotocorrente teve uma relação linear positiva com o valor logarítmico da concentração de hTR variando de 200 fM a 20,0 nM com um limite de detecção (LOD) de 17,0 fM. O LOD para CHA/HB-HCR foi cerca de 8,8 vezes menor do que o de CHA/reação Hibridizada em Cadeia Linear (CHA/LB-HCR) e 547 vezes menor do que o de CHA. Ao acoplar a característica de alta capacidade de amplificação de sinal para nanotecnologia de DNA, um biossensor PEC notavelmente estável, reprodutível e seletivo foi construído com sucesso e aplicado na detecção de hTR.