Determinación de las propiedades de unión a carbohidratos de la aglutinina de cacahuete mediante espectroscopía de diferencias ultravioleta.

La lectina anti-T de los cacahuetes fue purificada en una nueva matriz de afinidad, y el número de sitios de unión a carbohidratos se determinó mediante diálisis de equilibrio con 14C-lactosa en cuatro por tetrámero. Se encontró que el metilo-alfa y el metilo-beta-D-galactopiranósido y la lactosa perturbaban el espectro UV de la lectina en la región aromática y sus constantes de asociación se determinaron mediante espectroscopía de diferencias UV en 1.8, 1.0 y 1.3 x 10(3) M-1, respectivamente, a 25 grados C. También se obtuvieron parámetros termodinámicos para los dos galactósidos a partir de mediciones a varias temperaturas. Para el anómero alfa, delta H grados = -42 kJ mol-1 y delta S grados = -78 J K-1 mol-1; para el anómero beta, delta H grados = -43 kJ mol-1, y delta S grados = -86 J K-1 mol-1. El análisis de la lectina para átomos metálicos reveló 0.98 mol de Ca2+ y 0.78 mol de Mg2+ por subunidad, mientras que el manganeso estaba presente solo en cantidades mínimas. Los resultados del presente estudio indican que las mejoras recientes en la instrumentación deberían hacer que la espectroscopía de diferencias UV sea más ampliamente aplicable a estudios de interacciones proteína-ligando.