ヒトフリンコンバターゼによる形態的成長因子β1前駆体の処理

形態的成長因子ベータ前駆体（pro-TGFベータ）のプロテオリティック処理は、生物学的に活性なTGFベータホモダイメリックタンパク質（TGFベータ）の形成において不可欠なステップです。361アミノ酸からなる前駆体pro-TGFベータ1は、その一次構造内に多くの構成的に分泌される前駆体タンパク質に存在するR-H-R-R処理シグナルを持ち、哺乳類のコンバターゼファミリーのエンドプロテアーゼによって認識される可能性があります。in vitroでpro-TGFベータ1の切断がフリンコンバターゼによって達成できるかどうかを確認するために、精製した前駆体を酵素の切断/分泌型と共にincubationしました。免疫ブロットは、55-kDaのpro-TGFベータ1がプロ領域と成熟モノマーに対応する44kDaおよび12.5kDaバンドに変換されたことを示しました。プロ-TGFベータ1をフリンで処理すると、生物学的に活性なTGFベータ1の生成が5倍増加しました。さらに、フリン欠損LoVo細胞で発現させた場合、pro-TGFベータ1の処理は観察されませんでした。対照的に、pro-TGFベータがフリンコンバターゼと共発現された場合、効率的な処理が観察されました。これらの結果は、私たちの実験系においてTGFベータ1前駆体がヒトフリンによって効率的かつ正確に処理され、生物学的に活性なペプチドの放出を可能にすることを示す証拠を提供しています。