Comportamiento Electrofórico de Citochromos c de Tipo Mamífero

Resumen: Límites anómalos resultantes de la unión de un constituyente de un tampón dan la apariencia de inhomogeneidad electroforética a citochromos c nativos monoméricos cristalinos puros de 10 especies (humano, caballo, cerdo, guanaco, pato Pekin, paloma, pavo, atún, una polilla (Samia cynthia) y la mosca de la sonda). Los patrones electroforéticos dependen del citochrome c particular utilizado y su concentración, así como de la naturaleza del anión y su concentración. A pH 6.9, el orden de movilidad catódica creciente de la proteína es fosfato l cloruro ≤ yoduro l sulfato l cacodilato. Los cationes no tienen efecto. Los puntos isoiónicos de todos los citochromos c probados están a pH 10.04 ± 0.04 y son idénticos a los puntos isoeléctricos en el tampón tris(hidroximetil)aminometano-cacodilato sin unión. A valores de pH alejados de la región isoeléctrica, las movilidades electroforéticas de varios citochromos c difieren, como se esperaba de las diferentes cargas netas calculadas a partir de las composiciones de aminoácidos de las proteínas. Los cambios en la movilidad cromatográfica del citochrome c en resinas de intercambio catiónico a diferentes fuerzas iónicas son probablemente causados por los mismos fenómenos de reacción del tampón que afectan el comportamiento electroforético de la proteína. La notable constancia evolutiva de los puntos isoiónicos y de las cargas netas a pH neutro está relacionada con la importancia de esos parámetros fisicoquímicos en todas las reacciones fisiológicas del citochrome c y puede representar un caso de variaciones evolutivas compensatorias.