Análise quantitativa de eletroforetogramas bidimensionais.

Um método para análise quantitativa de distribuições de densidade de filme complexas em autorradiogramas é descrito. O método é especialmente destinado a medir a distribuição de radioatividade entre as proteínas resolvidas pela eletroforese em gel bidimensional, mas deve, é claro, ser adequado para analisar outras separações bidimensionais. A distribuição de densidade do filme é primeiramente digitalizada por um scanner rotativo de alta velocidade para gerar o array de dados de imagem que é armazenado em um disco magnético. A análise subsequente envolve: 1) média dos dados, 2) detecção de contornos e suas localizações, 3) separação de manchas sobrepostas, 4) conversão da densidade do filme para intensidade radioativa por meio de filmes de calibração, e 5) diferenciação e integração para medir a radioatividade total contida na proteína que gera uma mancha no autorradiograma. O produto da análise é um mapa de contorno numerado e uma tabela listando coordenadas e conteúdo de radioatividade de cada mancha resolvida. Transformações de coordenadas para comparação e ajuste de autorradiogramas também são descritas. Um conjunto de programas utilitários imprime e grafica os dados em estágios intermediários da análise para facilitar a verificação de procedimentos e programas.