Gsα स्प्लाईस वैरिएंट्स के विभिन्न प्रभाव β2-एड्रीनोकैप्टर-मध्यस्थ संकेत पर

बीटा2-एड्रीनोकैप्टर (beta2AR) जी-प्रोटीन जीएस के साथ जुड़ता है ताकि एडेनिलाइल साइक्लेज सक्रियण का मध्यस्थता किया जा सके। जीसाअल्फा के स्प्लाईस वैरिएंट्स में रास-सदृश डोमेन और अल्फा-हेलिकल डोमेन के बीच 15-एमिनो एसिड का अंतर्भाव होता है। जीसाअल्फा का लंबा स्प्लाईस वैरिएंट (GsalphaL) छोटे स्प्लाईस वैरिएंट (GsalphaS) की तुलना में जीडीपी के साथ कम उच्चता से बंधता है, लेकिन यह अंतर जीसाअल्फा और बीटा2एआर के पारस्परिकता पर क्या प्रभाव डालता है, यह ज्ञात नहीं है। हमने रिसेप्टर/जी-प्रोटीन फ्यूजन प्रोटीन (beta2ARGsalphaS और beta2ARGsalphaL) का उपयोग कर beta2AR/Gsalpha अंतःक्रिया का अध्ययन किया, जो Sf9 कोशिकाओं में व्यक्त किए जाते हैं। बीटा2एआर का जीसाअल्फा के साथ जोड़ प्रभावी युग्मन को बढ़ावा देता है जैसा कि उच्च उच्चता वाले अगोनिस्ट बंधन और जीटीपी-एज़ और एडेनिलाइल साइक्लेज सक्रियण द्वारा दिखाया गया है और रिसेप्टर और जी-प्रोटीन के बीच निश्चित स्टॉइचियोमेट्री सुनिश्चित करता है। महत्वपूर्ण रूप से, फ्यूजन बीटा2एआर या जीसाअल्फा की मौलिक विशेषताओं को नहीं बदलता। beta2ARGsalphaL में बीटा2एआर ने स्वायत्त गतिविधि के लक्षण दिखाए (आंशिक अगोनिस्ट की बढ़ी हुई क्षमता और अंतर्निहित गतिविधि, पलटवार अगोनिस्ट की बढ़ी हुई दक्षता, और बढ़ी हुई मूल जीटीपी-एज़ गतिविधि) की तुलना में beta2ARGsalphaS में बीटा2एआर के। Beta2ARGsalphaL में बीटा2एआर की स्पष्ट स्वायत्त गतिविधि जीसाअल्फाL की जीडीपी उच्चता की तुलना में जीसाअल्फाS के प्रति अधिक हो सकती है, अर्थात् जीसाअल्फाL अक्सर नाभिक-मुक्त होता है बनाम जीसाअल्फाS और, इस प्रकार, सक्रिय (R*) अवस्था में बीटा2एआर को स्थिर करने के लिए अधिक बार उपलब्ध होता है। यह अध्ययन प्रदर्शित करता है कि निकटता से संबंधित जी-प्रोटीन अल्फा-सबयूनिट के बीच सूक्ष्म संरचनात्मक भिन्नताएं एक जी-प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर के कार्यात्मक गुणों के लिए महत्वपूर्ण परिणाम हो सकती हैं।