铜绿假单胞菌非溶血性和溶血性磷脂酶 C 的分子比较

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）产生两种分泌型磷脂酶 C（PLC）酶。这两种 PLC 的表达均受 Pi 调控。其中一种 PLC 具有溶血性，另一种为非溶血性。低严谨度杂交研究表明，编码这两种 PLC 的基因具有 DNA 同源性。利用该信息克隆了 plcN，即编码 77-kilodalton 非溶血性 PLC（PLC-N）的基因。使用 plcN 的一个片段通过构建基因中断突变来突变 plcN 的染色体拷贝。该突变株产生的总 PLC 活性比野生型低 55%，证实了 plcN 的成功克隆。plcN 经测序，其编码的蛋白质与溶血性 PLC（PLC-H）具有 40% 的同一性。大部分同源性位于蛋白质的 NH2 端三分之二区域，而两种蛋白质剩余的三分之一氨基酸序列同源性极低。两种 PLC 均能水解磷脂酰胆碱；然而，每种酶具有独特的底物特异性。PLC-H 除水解磷脂酰胆碱外还能水解鞘磷脂，而 PLC-N 对磷脂酰胆碱和磷脂酰丝氨酸均有活性。这些研究提示了 PLC 活性与溶血作用之间的结构-功能关系。