Exploration des interactions à faible affinité et multivalentes par résonance de plasmon de surface : Ligands pour la concanavaline A

Les affinités de la protéine de liaison aux glucides, la concanavaline A (Con A), pour des ligands mono- et multivalents ont été mesurées par détection par résonance de plasmon de surface (SPR). L'évaluation des affinités protéine-glucide est généralement difficile en raison des faibles affinités observées et des complications qui découlent de l'importance de la multivalence dans ces interactions. Nous décrivons une méthode pratique pour évaluer rapidement les constantes d'inhibition pour un panel de différents ligands, à la fois monovalents et multivalents, pour des récepteurs à faible affinité, tels que la protéine de liaison aux glucides Con A. Un glycolipide substitué par le mannose, non naturel, a été synthétisé et des monocouches auto-assemblées de densité glucidique variable ont été générées. Les surfaces synthétiques lient Con A. Des expériences de compétition utilisant des ligands monovalents en solution ont donné des valeurs K i similaires aux constantes de liaison à l'équilibre obtenues lors des expériences de microcalorimétrie de titration. De plus, ce test pourrait être utilisé pour examiner divers ligands polymériques de longueurs définies, générés par polymérisation par métathèse d'ouverture d'anneau (ROMP). Cette étude démontre l'utilité de cette méthode pour dépister rapidement des ligands qui s'engagent dans des interactions à faible affinité avec leurs récepteurs cibles. Nos résultats soulignent que les molécules capables d'occuper simultanément deux sites de liaison aux saccharides ou plus au sein d'un oligomère de lectine sont des inhibiteurs efficaces des interactions protéine-glucide.