由镰刀菌引起的小麦头腐病(FHB)在全球造成了巨大的产量损失和真菌毒素污染。初步鉴定出具有强拮抗活性的多聚芽胞杆菌。为了阐明关键的抗真菌成分,通过硫酸铵沉淀、DEAE-52阴离子交换和Sephadex G-75凝胶过滤色谱法纯化出一种细胞外蛋白。SDS-PAGE显示在76 kDa处有单一条带。液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析确认该蛋白属于糖苷水解酶家族,序列覆盖率为86%。生化特性显示,粗蛋白在40–90 °C和pH 3.0–9.0下稳定,对蛋白酶K、胰蛋白酶和中性蛋白酶敏感。纯化后的76 kDa蛋白对镰刀菌表现出抗真菌活性。编码该蛋白的基因在大肠杆菌中克隆并表达。重折叠的重组蛋白p76kd显示出与天然蛋白相当的抗真菌活性。本研究通过LC-MS/MS肽匹配纯化并表征了一种76 kDa的糖苷水解酶,推测其抗真菌功能源于保守的糖苷水解酶结构域,这与以往报道的脂肽或未表征的复合物不同。该蛋白为生物防治小麦头腐病及相关真菌病害提供了有希望的候选者。
Ge等(周三)研究了这个问题。