ショウジョウバエにおけるセントロメアのアイデンティティは、in vivoでの複製タイミングによって決定されない

セントロメア特異的ヒストンCENP-Aによってセントロメリッククロマチンは特異的にマークされています。CENP-Aをヌクレオソームに組み込むためには、H3の沈降からの競合なしに進行することが提案されており、セントロメアは複製される最初または最後の配列の1つであるとされています。本研究では、ショウジョウバエの細胞株及び構造的に定義されたセントロメアを含むミニクロモソームを含む幼虫組織におけるセントロメアの複製を調査しました。CENP-Aのショウジョウバエホモログを含むクロマチンの複製タイミングを評価するために、2つの異なるヌクレオチド取り込み法が使用されました。ショウジョウバエの細胞株におけるセントロメアはS期全体にわたって複製されましたが、主に中S期に複製されました。しかし、内因性セントロメアとX由来のミニクロモソームのセントロメアは、in vivoで中S期から後S期に非同期的に複製されました。構造的に完全なセントロメアを持つミニクロモソームは後S期に複製され、セントロメアと周囲のヘテロクロマチンが部分的または完全に削除されたものは中S期に早く複製されました。我々は、セントロメリッククロマチンがS期の異なるタイミングで複製されるという初のin vivoの証拠を提供します。これらの研究は、CID/CENP-Aの新しく複製されたセントロメアへの取り込みが複製タイミングに依存しないことを示しており、セントロメアのアイデンティティが大規模なゲノミッククロマチンに対するセントロメリッククロマチン複製の時間的隔離によって決定されることに反対しています。