Production of Antibodies to Canine Distemper Virus in Chicken Eggs for Immunohistochemistry

Summary The present study describes the application of egg yolk antibodies in immunohistochemistry. In order to obtain specific antibodies against canine distemper virus (CDV), chickens were immunized with attenuated virus. Distinct antibody titres in serum and yolk could be detected by means of a modified plaque / focus immunoassay (ELISA) two weeks after a second immunization. The lower concentrations in corresponding yolk globulin preparations are attributed to the loss of antibodies caused by the isolation procedure (dextrane and ammonium sulfate precipitation). After verification of the antibody specificity by indirect immunofluorescence technique high titred globulin fractions were employed in immunohistochemistry using the Avidin‐Biotin‐Complex method. A specific and distinct immunostaining in formalin fixed and paraffin embedded brain sections of CDV‐infected dogs was obtained. The advantages of egg yolk antibodies for immunological purposes are discussed in detail. Zusammenfassung Gewinnung von Staupe‐Antikörpern aus dem Hühnerei und ihre Verwendung in der Immunhistochemie Die vorliegende Studie beschreibt die Verwendung von Antikörpern aus dem Eidotter in der Immunhistochemie. Um spezifische Antikörper gegen das Hundestaupevirus (CDV) zu gewinnen, wurden Hühner mit attenuiertem Virus immunisiert. Mit Hilfe eines modifizierten Plaque/Focus ELISA konnten bereits 14 Tage nach der zweiten Immunisierung deutliche Antikörpertiter in Serum und Dotter festgestellt werden. Die geringeren Konzentrationen in den entsprechenden Dotterglobulinpräparationen können auf Antikörperverluste, bedingt durch das Isolierungsverfahren (Dextransulfat‐ und Ammoniumsulfatfällung), zurückgeführt werden. Nach der Überprüfung der Antikörperspezifität mittels indirekter Immunfluoreszenztechnik wurden die hochtitrigen Globulinfraktionen in der Immunhistochemie unter Verwendung der Avidin‐Biotin‐Complex‐Methode eingesetzt. In formalin‐fixierten und paraffineingebetteten Hirnschnitten staupeinfizierter Hunde konnte Virusantigen spezifisch markiert werden. Die Vorteile der Eidotterantikörper für immunologische Zwecke werden eingehend diskutiert.