Las subunidades individuales contribuyen de manera independiente al cierre lento de los canales de potasio EAG bovinos

El gen bovino ether à go-go codifica un canal de potasio rectificador retardado. A diferencia de otros rectificadores retardados, la cinética de activación está determinada en gran medida por el potencial de retención y la concentración de Mg2+ extracelular, lo que da lugar a corrientes de activación lenta con una fase ascendente sigmoidal característica. La sustitución de un único aminoácido en el conector extracelular entre los segmentos transmembrana S3 y S4 (L322H) redujo fuertemente la dependencia del prepulso y aceleró la activación en un orden de magnitud. Además, en comparación con el tipo salvaje, el voltaje de media activación de este mutante se desplazó más de 30 mV hacia potenciales más negativos. Utilizamos construcciones diméricas y tetraméricas del gen bovino eag1 para analizar canales con estequiometría definida de subunidades mutadas y de tipo salvaje dentro de los complejos de canales tetraméricos. Con un creciente número de subunidades mutadas, la activación del canal se aceleró progresivamente, y la sigmoidalidad de las trazas de corriente se redujo. Basado en un análisis cuantitativo, mostramos que el cierre lento, típico de los canales EAG, es mediado por transiciones conformacionales independientes de subunidades individuales, que obtienen su dependencia del voltaje del segmento S4. A un voltaje dado, el Mg2+ externo aumenta la probabilidad de que una subunidad del canal esté en la conformación de activación lenta, mientras que la mutación L322H reduce fuertemente esta probabilidad.