In vitro pollen tube growth in Douglas-fir

La germination du pollen de Douglas taxifolie (Pseudotsuga menziesii (Mirb.) Franco) se fait en deux etapes au cours desquelles le pollen s'allonge, puis forme un tube pollinique qui penetre le nucelle en direction des archegones. Nous proposons ici une methode qui, pour la premiere fois, permet d'obtenir des tubes polliniques in vitro. L'allongement du pollen a ete obtenu sur le milieu Brewbaker et Kwack modifie par l'addition de 0,3 M saccharose, glucose ou fructose et (ou) differentes concentrations de polyethylene glycol 4000 (PEG). En presence de saccharose seul, les grains s'allongent rapidement. Le taux de survie est meilleur en presence de PEG-glucose. Le fructose s'est avere lethal. Pour obtenir des tubes polliniques, le pollen a ete saupoudre sur des membranes deposees sur le milieu Brewbaker et Kwack contenant soit 10% PEG et 0,3 M saccharose, soit 25% PEG. Apres 7 jours d'elongation, le pollen a ete transfere sur un milieu identique contenant divers flavonoides (trois flavonols et une flavanone) dissous dans du dimethyl sulphoxide. Suivant le milieu et le traitement, 10-30% des grains ont forme un tube pollinique. Seuls les flavonols ont induit la formation de tubes, lesquels etaient courts et difformes en presence de saccharose mais allonges et droits lorsque PEG etait utilise seul.