基于 CRISPR-Cas13 转录扩增技术检测 SARS-CoV-2 及其突变变异株

严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）的暴发引发了全球公共卫生紧急事件，其基因突变和进化进一步增加了疫情风险的不确定性。在此，我们报道了一种发光 CRISPR-Cas13 转录扩增方法，该方法能够检测 SARS-CoV-2 及其突变变异株。通过连接过程和 Cas13a/crRNA 识别双重保证序列特异性，使我们能够识别病毒 RNA 突变。发光 RNA 适体通过 CRISPR-Cas13a 的靶标激活核糖核酸酶活性实现扩增信号的灵敏输出。该 RNA 病毒检测法已被设计用于检测冠状病毒、SARS-CoV-2、中东呼吸综合征（MERS）和 SARS，以及流感病毒（如 H1N1、H7N9 和 H9N2）。其可检测低至 82 个拷贝的 SARS-CoV-2。特别是，它使我们能够严格区分可能引发更高流行和致病风险的 SARS-CoV-2 变异株关键突变 D614G。所提出的 RNA 病毒检测法在 SARS-CoV-2 及其高风险变异株的即时（point-of-care）监测中具有广阔的应用前景。