Magnetic enzyme-linked immunosorbent assay (MELISA) for determination of specific IgG in paracoccidioidomycosis

A magnetic solid phase enzyme-linked immunosorbent assay (MELISA) for quantification of IgG antibodies to somatic and metabolic antigens of Paracoccidioides brasiliensis was developed. Activation of magnetic polyacrylamide agarose beads with concanavalin A was superior to glutaraldehyde activation, and test sensitivity was higher for somatic than for metabolic antigens. Comparative MELISA, counterimmunoelectrophoresis and erythroimmunoassay tests with sera from 33 proven cases of paracoccidioidomycosis, 14 cases of histoplasmosis and 20 normal human sera showed the MELISA could distinguish antibody levels in paracoccidioidomycosis from those in normal sera; however two sera from histoplasmosis cases cross-reacted in the MELISA. MELISA is a rapid test (5–6 h) and the results suggest it has considerable potential value for assay of anti-P. brasiliensis antibodies. Fue desarrollada una brueba de MELISA para la quantificatión de anticuerpos IgG anti antigenos somático y metabólico de P. brasiliensis. La activación de las pérdidas magnéticas de poliacrilamida agarosa con concanavalina A fue superior a la activación obtenida con glutaraldeido. La sensibilidad de la prueba fue mayor con el antígeno somático que con el antígeno metabólico. Realizando el estudio comparativo de las pruebas de MELISA, contrainmunoelectroforesis y eritroinmunoadsorción con sueros de 33 pacientes con paracoccidioidomicosis, 14 con histoplasmosis y 20 sueros humanos normales, fue posible establecer que la prueba de MELISA puede distinguir los niveles de anticuerpos de los pacientes con paracoccidioidomicosis de los normales y de los con histoplasmosis. Sin embargo, dos sueros de pacientes con histoplasmosis reaccionaron cruzadamente con la prueba de MELISA. Hubo correlación entre los resultados obtenidos con la prueba de MELISA con los titulos encontrados con eritro-inmunoadsorción no encontrándose el mismo fenómeno en relación al número de líneas de precipitación obtenidas con inmunoelectroforesis. Los resultados obtenidos y la rapidez de su realizacíon sugieren que la prueba de MELISA es un recurso de laboratorio de gran potencial en la detección de anticuerpos anti-P. brasiliensis.