Screening for Ectasia Risk: What Are We Screening For and How Should We Screen For It?

Objetivo: O acesso a imunizantes contra a COVID-19 permanece desigual em diferentes regiões do mundo. Nesse contexto, vacinas baseadas em proteínas recombinantes, especialmente no Domínio de Ligação ao Receptor (RBD), destacam-se por seu perfil de segurança e eficácia, potencial de escalabilidade, menor custo para países de baixa e média renda e estabilidade em condições de refrigeração, características que favorecem sua distribuição em regiões remotas. Neste trabalho, comparamos a imunogenicidade de diferentes proteínas recombinantes contendo o RBD, formuladas com diferentes adjuvantes. Métodos: As proteínas monomérica e homodimérica da cepa Wuhan, as proteínas monoméricas das variantes Beta, Gamma e Delta e o heterotrímero Beta:Gamma:Delta foram produzidas em sistema de expressão eucariótico e formuladas com diferentes adjuvantes. Camundongos C57BL/6 e BALB/c receberam duas ou três doses das formulações, e as respostas imunes humoral e celular foram avaliadas por ELISA, ensaios de neutralização, ELISpot, citometria de fluxo, ensaio de desafio viral e quantificação de carga viral por RT qPCR. Resultados: As construções multimerizadas, especialmente o heterotrímero, induziram respostas humorais superiores, com maior magnitude, afinidade e amplitude de neutralização frente a diferentes variantes, além de proteção contra o desafio com a cepa Wuhan e controle da replicação viral nos pulmões. A otimização da formulação vacinal revelou que a combinação dos adjuvantes AddaS03 e Poly I:C promoveu resposta humoral robusta, associada predominantemente ao AddaS03, concomitante a uma resposta celular de perfil Th1, favorecida pelo Poly I:C. Nossos resultados sugerem uma ação sinérgica entre os adjuvantes, resultando em efeitos não observados quando cada adjuvante foi usado isoladamente. No mapeamento de epítopos de células T, em C57BL/6 o peptídeo 12 foi identificado como epítopo restrito ao MHC de classe II, enquanto os peptídeos 28 e 29 foram identificados como epítopos restritos ao MHC de classe I. Em BALB/c, os peptídeos 6, 19 e 20 foram mapeados como epítopos restritos ao MHC de classe II e não foram identificados epítopos de classe I neste modelo experimental. Conclusões: Em conjunto, os dados demonstram que a formulação contendo o heterotrímero de RBD associada à combinação de adjuvantes AddaS03 + Poly I induziu as respostas imunes mais robustas, tanto em termos quantitativos quanto qualitativos. Esses resultados contribuem para o desenvolvimento de vacinas baseadas no RBD e, de forma mais ampla, de vacinas de subunidade proteica capazes de promover uma resposta humoral robusta e equilibrada, associada a resposta celular de perfil Th1. Mostrar mais