Enzyme-linked immunosorbent assay for myosin heavy chains in the horse

― The content in slow and fast myosin heavy chains (MHC 1 and MHC 2) of 5 equine muscles was determined using an enzyme-linked immunosorbent assay.The results obtained with this immunoenzymatic method were compared with complementary techniques: electrophoresis and immunohistochemistry. Slices of masseter, diaphragm, tensor faciae latae, semitendinosus and cuta- neus trunci were obtained from a 12-year-old saddle horse after slaughter.Muscular proteins were specif- ically extracted to be analysed by ELISA.The technique used 2 complimentary monoclonal antibodies (MAb).MAb 1 was prepared from a human atrium specimen that reacted specifically against MHC 1. Mab 2 was prepared from myosin of rabbit psoas muscle and reacted against MHC 2. The masseter muscle contained solely MHC 1 (100%) and this was confirmed by electrophoresis and immunohis- tochemistry.By contrast, the cutaneus trunci was very poor in MHC 1 (1.3%) and was entirely composed of MHC 2 (98.7%) which was confirmed by the other techniques.The diaphragm, tensor fasciae latae and semitendinosus contained 89, 40 and 2% of MHC 1, respectively.It was concluded that this ELISA method made it possible to measure a wide range of MHC contents in equine muscles with a good reproducibility.The results were consistent with those of the other fibre typing techniques.More- over, this immunoenzymatic method is less time consuming than histological techniques and therefore offers new perspectives for muscle fibre typing in the horse.horse / muscle / myosin heavy chain / ELISA Résumé ― Méthode de dosage ELISA des chaînes lourdes de la myosine chez le cheval.La com- position en chaînes lourdes de la myosine lente (MHC 1) et rapide (MHC 2) a été déterminée dans 5 muscles équins par une méthode de dosage ELISA.Les résultats obtenus par cette technique immu- noenzymatique ont été comparés avec d'autres méthodes de typage des fibres musculaires : l'élec- trophorèse et l'immunohistologie.Des tranches de masséter, de diaphragme, de Tensor fasciae latae, de Semitendinosus, et de Cutaneus trunci ont été prélevées sur un cheval de selle de 12 ans eutha- nasié pour colique.Les protéines musculaires sont extraites par une méthode spécifique et les chaînes lourdes de la myosine sont dosées par une technique ELISA au moyen de 2 anticorps monoclonaux (MAb) complémentaires.MAb 1 a été préparé à partir de muscle cardiaque de l'atrium humain et il réagit spécifiquement avec MHC 1. MAb 2 a été préparé à partir de muscle psoas de lapin et réagit spécifiquement avec MHC 2. Le masséter est exclusivement composé de MHC 1 (100%), ce qui est confirmé par l'électrophorèse et l'immunohistologie.À l'inverse, le Cutaneus trunci est presque exclusivement constitué de MHC 2 (98,7% MHC 2).Le diaphragme, le Tensor fasciae latae et le Semitendinosus contiennent respectivement 89, 40 et 2% de MHC 1. Cette technique de dosage ELISA des chaînes lourdes de la myosine permet de mesurer avec une bonne reproductibilité des compositions très variables en MHC sur les muscles du cheval.Les résultats de dosage sont en accord avec les autres méthodes de dosage.De plus, pour effectuer le typage musculaire, la productivité de cette méthode immunoenzymatique est plus grande que les techniques histologiques, ce qui ouvre de nouvelles perspectives d'applications pour analyser des effectifs importants.cheval/muscle / chaÎne lourde de la myosine / ELISA