Effects of freezing-thawing on the spermatozoon nucleus: a comparative chromatin cytophotometric study in the porcine and human species

Summary― Freezing-thawing effects on the nuclei of porcine and human spermatozoa were stud- ied by determining native DNA percentage from fluorescence after acridine orange (AO) staining and by analyzing chromatin structure by a quantitative microspectrophotometric study of Feulgen-DNA complexes before and after freezing.The study of boar spermatozoa revealed no alteration in native DNA percentage after freezing.However, native DNA percentage decreased significantly in human spermatozoa.Feulgen-DNA content and sperm nuclear surface area decreased in both species after freezing.These results prompted us to hypothesize an overcondensation of sperm chromatin after freezing-thawing.This overcondensation may be related to the lower conception rates obtained with human and porcine semen after cryostorage via defective decondensation.freezing-thawing I spermatozoon / chromatin / acridine orange / Feulgen-DNA / boar / man Résumé ― Effet de la congélation sur le noyau des spermatozoïdes : Etude cytophotométrique comparative entre le verrat et l'homme.L'effet de la congélation sur le noyau des spermatozoïdes a été étudié en déterminant le taux dADN natif, en microscopie à fluorescence, par le mar- quage à I Acridine Orange et en analysant la structure de la chromatine par l'étude microspectrophotométrique quantitative de 1 ADN-Feulgen, avant et après congélation de spermatozoïdes porcins et humains.L'étude réalisée chez le verrat ne montre pas d altération du taux d'ADN natif après congélation.En revanche ce taux est significativement diminué dans les mêmes condi- tions chez l'homme.En outre pour ces 2 espèces, nous avons observé une réduction significative des complexes ADN-Feulgen après congélation, qui s accompagne également d'une diminution de la surface des noyaux des spermatozoïdes.Ces résultats évoquent une compaction ou -surcondensation» des noyaux au-delà de l'état de condensation acquis en fin de maturation épididymaire.Le taux d ADN natif semble, chez l'homme, apporter une information complémentaire sur l'appréciation du pouvoir fécondant du sperme avant et après congélation.Chez le verrat comme chez l'homme, l'état de H surcondensation•• nudéaire provoqué par la congélation pourrait, en retar- dant la décondensation du pronucleus paternel, expliquer en partie la diminution du taux de concep- tion lors d'insémination avec sperme congelé.