Lactococcus Lactis Strain A5 Producing Nisin-like Bacteriocin Active against Gram Positive and Negative Bacteria

Abstrak: Dalam kajian ini, strain bakteria asid Laktik (LAB) telah dipencilkan pada medium MRS daripada tisu gastro-intestinal ikan keli Broadhead (Clarias macrocephalus).Daripada 50 isolat, 25 isolat didapati positif pada ujian penggunaan laktosa dan dikenal pasti sebagai cocci gram positif.Dengan menggunakan kaedah penyebaran cakera, satu daripada 22 isolat, iaitu, strain A5 menunjukkan hambatan terhadap tiga organisma penunjuk; Bacillus cereus, Staphylococcus aureus dan Salmonella thyphimurium.Susunan seksyen 16S rDNA dikenal pasti mengasingkan A5 sebagai ahli Lactococcus lactis, dengan 100% homologi DNA.Cecair supernatan bebas dari Lactococcus lactis A5 menunjukkan aktiviti perencatan terhadap kedua-dua patogen positif gram (Bacillus cereus dan Staphylococcus aureus) dan gram negatif patogen (Salmonella thyphimurium).Chloroform precipitated bacteriocin mengekalkan aktiviti antagonistik di hadapan katalase dan lysozyme; Dan benar-benar tidak aktif oleh rawatan Proteinase K. Bacteriocin mempunyai berat molekul 3.4 kDa, berdasarkan analisis SDS-PAGE dan ekstrak adalah haba stabil pada 37 °C dan 65 °C, selama 15 minit.Aktiviti antibakteria direncat dengan penambahan EDTA tetapi meningkat dengan ketara dengan penambahan SDS, Triton X-100, Tween 20 dan Tween 80. Bacteriosin ini tergolong dalam kelas 1 bacteriocin, yang ditunjukkan mempunyai sifat seperti nisin.Strain ini boleh