Mineralkortikoid-Rezeptoren entlang des Nephrons: 3Haldosteronbindung in Kaninchenkanälchen

Um den Ort der Mineralokortikoidwirkung entlang des Nephrons zu bestimmen, maßen wir die spezifische Bindung von 3Haldosteron an Nephronsegmente, die aus aldosteron-defizienten Kaninchen mikrodisseziert wurden. Die spezifische Bindung wurde definiert als der Unterschied zwischen der Bindung, die in Abwesenheit oder in Anwesenheit von 2000-fachem Überschuss eines unlabeled Hormons gemessen wurde (in 10(-18) mol X cm Tubuslänge-1 +/- SE). Eine hohe spezifische Bindungskapazität wurde im verzweigten Sammelkanälchen (108 +/- 4), dem kortikalen Sammelkanälchen (119 +/- 9) und dem äußeren medullären Sammelkanälchen (115 +/- 16) gefunden, während die spezifische Bindung im proximalen convolutierten Tubulus (8 +/- 9), der pars recta (2 +/- 6), dem medullären dicken aufsteigenden Ast (4 +/- 6), dem kortikalen dicken aufsteigenden Ast (6 +/- 2) und dem distalen convolutierten Tubulus (6 +/- 6) vernachlässigbar war. In kortikalen Sammelkanälchen zeigte die Scatchard-Analyse der spezifischen 3Haldosteron-Bindung eine Dissoziationskonstante (KD) von 2,2 X 10(-9) M und eine maximale Anzahl von Bindungsstellen von 157 X 10(-18) mol X cm Tubuslänge-1. Die Steroidspezifität wurde aus der Konkurrenz verschiedener Steroide um 3Haldosteron-Bindungsstellen bewertet. Rezeptoren aus dem kortikalen Sammelkanälchen wiesen die folgende Affinitätssequenz auf: Aldosteron größer als DOCA größer als Spironolacton größer als Dexamethason größer als 5 Alpha-Dihydrotestosteron = Progesteron = 17 Beta-Estradiol, was darauf hindeutet, dass die Bindungsstellen im Sammelkanälchen Mineralokortikoid-Rezeptoren sind. Diese Ergebnisse zeigen signifikante 3Haldosteron-Bindung an Rezeptoren mit hoher Affinität und Mineralokortikoidspezifität nur im Sammelkanälchen und deuten darauf hin, dass dieses Nephronsegment der Zielort der Mineralokortikoidwirkung in der Niere des Kaninchens ist.