Fractionneur Isotrope : Une méthode simple et rapide pour la quantification du nombre total de cellules et de neurones dans le cerveau

Les techniques stéréologiques qui estiment les nombres de cellules doivent être limitées à des structures bien définies d'architecture isotrope et ne s'appliquent donc pas à l'ensemble du cerveau ou à de grandes régions neuronales. Nous avons développé une méthode novatrice, rapide et peu coûteuse pour quantifier les nombres totaux de cellules neuronales et non neuronales dans le cerveau ou dans toute région disséquée. Elle consiste à transformer des structures cérébrales hautement anisotropes en suspensions homogènes et isotropes de noyaux cellulaires, qui peuvent être comptés et identifiés immunocytochimiquement comme neuronaux ou non neuronaux. Des estimations du nombre total de cellules, neuronales et non neuronales peuvent être obtenues en 24 heures et varient de moins de 10 % parmi les animaux. Étant donné que les estimations obtenues sont indépendantes du volume cérébral, elles peuvent être utilisées dans des études comparatives de variation de volume cérébral entre espèces et dans des études de phylogenèse, de développement, de neurogenèse adulte et de pathologie. En appliquant cette méthode au cerveau du rat adulte, nous montrons, par exemple, qu'il contient environ 330 millions de cellules, dont 200 millions de neurones, et presque 70 % de ces neurones se trouvent uniquement dans le cervelet. De plus, contrairement à ce qui est couramment supposé dans la littérature, nous montrons que les cellules gliales ne constituent pas la majorité dans le cerveau du rat.