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Wir haben ein positives Regulationsgen (toxR) von Vibrio cholerae kloniert, das die Transkription des Cholera-Toxins steuert. Dies wurde erreicht, indem zunächst eine genetische Fusion konstruiert wurde, die aus dem lacZ-Gen bestand, das mit dem Promoter des Cholera-Toxin-Operons ctxAB fusioniert ist. Diese Operonfusion wurde verwendet, um eine genomische Bibliothek von V. cholerae auf Gene zu screenen, die den ctx-Promoter in Escherichia coli aktivieren könnten. Mit dieser Methode konnte ein Gen, toxR, identifiziert werden, das die ctx-Expression um mehr als das 100-Fache erhöht. Komplementationsanalysen deuteten darauf hin, dass bestimmte hypotoxinogene Mutanten von V. cholerae 569B wahrscheinlich Mutationen im toxR-Gen aufweisen. Southern-Blot-Analysen legen nahe, dass alle V. cholerae, einschließlich nicht-toxigenen Stämmen, das toxR-Gen besitzen. Darüber hinaus fehlen nicht-toxigene Stämme nicht nur die strukturellen Gene für das Cholera-Toxin, sondern auch Sequenzen, die mit dem größeren 7-Kilobase-ctx-Gen-Element assoziiert sind.
Miller et al. (Freitag) haben diese Frage untersucht.
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