Spezifische Bindung an kultivierte Zellen des 125I-markierten TGF beta aus menschlichen Thrombozyten.

Der gereinigte Typ beta wachstumsfaktor (TGF beta) aus menschlichen Thrombozyten, radioiodiniert mit 125I-markiertem Bolton und Hunter-Reagens, bindet an eine Vielzahl von kultivierten Zellen sowohl epithelialen als auch mesenchymalen Ursprungs, einschließlich normaler menschlicher Fibroblasten und Keratinozyten. Binderstellen für TGF beta wurden auch auf drei von Mausembryos abgeleiteten fibroblastähnlichen Zelllinien gefunden, wobei die chemisch transformierten Derivate dieser Zelllinien niedrigere TGF beta-Bindungsniveaus aufwiesen. Eine Vielzahl menschlicher Tumorzelllinien zeigte eine umgekehrte Korrelation zwischen ihrem TGF beta-bindungsgrad und ihrer Fähigkeit, Kolonien in weichem Agar zu bilden. Die von Mausembryos abgeleiteten AKR-2B (Klone 84A) Zellen erreichten nach 2 Stunden bei 22 Grad C die maximale Bindung von 125I-markiertem TGF beta. Die Scatchard-Analyse der Gleichgewichtsbindung von TGF beta an AKR-2B (Klone 84A) Zellen ergab ein Kd von 33 pM mit ungefähr 10.500 Bindungsstellen pro Zelle. Dieses Kd für die TGF beta-Bindung an AKR-2B (Klone 84A) Zellen stimmte gut mit dem ED50 von 40 pM zur Stimulation der Kolonienbildung dieser Zellen durch TGF beta überein. Die TGF beta-Bindungsstellen auf den AKR-2B Zellen waren spezifisch für TGF beta, ohne signifikante Konkurrenz mit epidermalem Wachstumsfaktor, fibroblastärem Wachstumsfaktor oder Insulin und nur ein geringes Maß an Konkurrenz mit hohen Konzentrationen von thrombozytenabgeleitetem Wachstumsfaktor. Teilweise gereinigte Präparationen mit TGF beta-ähnlicher Aktivität aus Mausembryos und mit Medium, das von Mausembryo-abgeleiteten Zellen konditioniert wurde, konkurrierten effektiv um die Bindung an den TGF beta-Rezeptor.