Evidenz für die translationale Regulation des Aktivators der allgemeinen Kontrolle der Aminosäuren in Hefe.

Das GCN4-Gen kodiert einen positiven Regulator von ungebundenen Biosynthese-Genen für Aminosäuren in Hefe. Ich präsentiere Beweise dafür, dass das GCN4-Gen selbst durch die Verfügbarkeit von Aminosäuren reguliert wird und dass die Regulation auf der translationalen Ebene erfolgt. Eine GCN4-lacZ-Fusion wurde als Maß für die Expression des GCN4-Genprodukts verwendet. Hunger nach Histidin führt zur Derepression des Fusionsenzym im Wildtyp, jedoch nicht in einem gcn2- Stamm. Die gcn2- Mutation reduziert nicht die Fusions-Transkriptspiegel im Vergleich zum Wildtyp, was darauf hindeutet, dass das Produkt von GCN2 als Aktivator der GCN4-Translation fungiert. Das GCN4-Transkript hat einen 5'-Leader, der ungefähr 600 Nukleotide lang ist und vier kleine offene Leserahmen enthält. Eine Löschung der kleinen offenen Leserahmen führt zu einer konstitutiven Derepression der Fusionsenzymspiegel, bedingt durch eine ungefähr 10-fache Steigerung der Effizienz der Translation des Fusions-Transkripts. Die Löschung unterdrückt die Anforderung an die GCN2-Funktion. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass der 5'-Leader von GCN4 in cis wirkt, um die GCN4-Translation zu repressieren, und dass die GCN4-Translation als Antwort auf Aminosäurenmangel aufgrund der Antagonismus von GCN2 gegen die repressiven Sequenzen im 5'-Leader von GCN4 zunimmt.