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Die kürzliche Entwicklung robuster Methoden zum Wachstum humaner Gewebe als 3D-Organoide ermöglicht es uns, die 3D-Architektur von Tumoren in einem in vitro-Setting nachzubilden und bietet einen neuen orthogonalen Ansatz für die Wirkstoffentdeckung. Allerdings war die Kultivierung von Organen mit extrazellulärer Matrix zur Unterstützung der 3D-Architektur aufgrund technischer Schwierigkeiten herausfordernd für die auf hochdurchsatzbasiertes Screening (HTS) ausgelegte Wirkstoffentdeckung. Unter Verwendung genetisch veränderter menschlicher Colon-Organoide als Modellsystem berichten wir hier über unsere Bemühungen, eine solche 3D-Organoid-Kultivierung mit Unterstützung der extrazellulären Matrix in hochdichten Platten zu miniaturisieren, um HTS zu ermöglichen. Zunächst etablierten wir die Kultivierung von Organoiden im Format einer 384-Well-Platte und validierten ihre Anwendung in einem Zellviabilitäts-HTS-Assay durch Screening einer Bibliothek mit 2036 Verbindungen. Wir miniaturisierten die 3D-Organoid-Kultivierung weiter im Format einer 1536-Well-ultra-HTS-Platte und demonstrierten ihre robuste Leistung für das großangelegte primäre Verbindungen-Screening. Unser miniaturisiertes Verfahren zur Kultivierung von Organen kann auf andere Organoidtypen angepasst werden. Durch die Nutzung der Stärke der 3D-Organoid-Kultivierung in einem hochdichten Plattenformat bieten wir eine physiologisch relevante Screening-Plattform zur Modellierung von Tumoren, um die organoidbasierte Forschung und Wirkstoffentdeckung zu beschleunigen.
Du et al. (Fr,) haben diese Frage untersucht.