Redesenho de Linhagens Celulares de Embalagem de Retrovírus para Evitar Recombinação que Leva à Produção de Vírus Auxiliares

Vetores de retrovírus podem ser feitos na ausência de vírus auxiliar utilizando linhagens celulares de embalagem de retrovírus. O vírus livre de auxiliares é crítico para uma variedade de estudos de transferência gênica. As linhagens celulares de embalagem mais úteis contêm DNA de vírus auxiliar do qual o sinal necessário para a embalagem do genoma de RNA viral em virions foi deletado. No entanto, mostramos que a capacidade de embalar vírus é conferida a uma frequência muito baixa para células infectadas com vírus dessas linhagens celulares de embalagem, presumivelmente pela transmissão de baixa frequência do genoma viral deletado. Além disso, essas linhagens celulares de embalagem podem interagir com alguns vetores retrovirais para gerar vírus competentes para replicação. Construímos linhagens celulares de embalagem contendo DNA de vírus auxiliar que tinha várias alterações além da deletação do sinal de embalagem. As novas células de embalagem mantiveram as características úteis das linhagens anteriormente disponíveis, mas não produziram vírus auxiliar após a introdução de quaisquer dos vetores testados, e a transferência da função de embalagem não foi detectada.