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Estudos utilizando anticorpos para imunolocalizar a proteína granular densa GRA3 do Toxoplasma gondii mostraram que essa proteína se associa fortemente com a membrana do vacúolo parasitóforo (PVM). No entanto, como não havia um domínio de membrana predito, isso destacou um paradoxo não resolvido. Demonstramos que a sequência publicada anteriormente para a GRA3 é, na verdade, uma quimera artificial de 2 proteínas. Uma proteína, com peso molecular de 65 kDa, compartilha o C-terminal com a GRA3 publicada e não possui similaridade significativa de sequência com qualquer proteína até agora depositada no Genbank. A segunda, com um peso molecular predito de 24 kDa, compartilha a região N-terminal, é reconhecida pelo anticorpo monoclonal 2H11 conhecido por reagir com os grânulos densos de T. gondii e é, portanto, a GRA3 autêntica. A GRA3 corrigida possui uma sequência de sinal secretório N-terminal e um domínio transmembranar consistente com sua inserção no PVM. Anticorpos contra a GRA3 recombinante reconhecem uma proteína de 24 kDa em preparações de antígeno excretório-secretório de T. gondii. O peptídeo sinal é necessário e suficiente para direcionar GFP aos grânulos densos e ao vacúolo parasitóforo. Um homólogo foi identificado em Neospora caninum. Finalmente, a GRA3 possui um motivo de recuperação de retículo endoplasmático (RE) com dilisina 'KKXX' que racionaliza sua associação com o PVM e possivelmente com o RE da célula hospedeira.
Henriquez et al. (Ter,) estudaram essa questão.
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