Clonagem, expressão e caracterização de uma proteína sintetase de óxido nítrico de Deinococcus radiodurans

Clonamos, expressamos e caracterizamos uma hemoproteína de Deinococcus radiodurans (sintetase de NO D. radiodurans, deiNOS) cuja sequência é 34% idêntica ao domínio oxigenase das sintetases de NO de mamíferos (NOSoxys). A deiNOS era dimérica, ligava o substrato Arg e o cofator tetraidrobiopterina, e tinha um ambiente de heme normal, apesar de suas estruturas N-terminais estarem faltando, as quais em NOSoxy se ligam ao Zn(2+) e à tetraidrobiopterina e ajudam a formar um dímero ativo. O heme da deiNOS aceitou elétrons de uma redutase NOS de mamíferos e gerou NO em taxas que atenderam ou superaram as de NOSoxy. A atividade exigia tetraidrobiopterina ou tetraidrofolato ligadas e estava relacionada à formação e desaparecimento de um intermediário catalítico típico de heme-dioxi. Assim, as proteínas do tipo NOS bacterianas são surpreendentemente semelhantes às NOS de mamíferos e ampliam nossa perspectiva sobre a bioquímica e função do NO.