带电蛋白质和聚电解质之间的复杂共凝聚在没有膜的细胞器和生物医学应用中具有广泛的相关性。与特征明确的合成聚电解质不同,蛋白质共凝聚物由于数量有限、温和处理的限制、pH值的细微调控和离子强度对电荷斑或非库仑结合影响的限制,带来了实验挑战。为了缓解这些限制,我们建议使用微透析芯片,允许对微体积进行原位控制。我们研究了模型溶菌酶/聚谷氨酸共凝聚物。与不同浓度的磷酸盐缓冲液的快速平衡显示:(i) 由于释放的反离子影响超过80 g/L溶菌酶的相图,离子强度的细微控制至关重要;(ii) 相分离是可逆的;(iii) 聚谷氨酸的手性影响共凝聚;(iv) 共凝聚物可以退火成均匀薄膜,允许在流体状态到固体状态的转变中进行FRAP测量,表现为聚谷氨酸扩散率在60 mM磷酸盐以下显著降低。
Brassart 等人(周三)研究了这个问题。