慢性收缩活动引发的细胞外囊泡对路易斯肺癌细胞的促凋亡作用

摘要 定期锻炼能在体内和体外减少肿瘤生长，但确切机制尚未完全阐明。我们之前已表明，慢性收缩活动（CCA）增加了骨骼肌来源的胞外囊泡（EVs）浓度，而这些囊泡又增加了肌母细胞中的线粒体生物合成。在此，我们假设来源于CCA后的骨骼肌EVs将介导与慢性锻炼相关的抗肿瘤效应。C2C12肌母细胞被分化为肌管，通过电刺激，使用差异离心法从对照组和CCA肌管的条件培养基中分离出EVs。将路易斯肺癌（LLC）细胞用在每次4天收缩活动后分离的对照-EVs或CCA-EVs的总数处理。与LLC细胞共同培养之前，预处理的CCA-EVs（有或没有蛋白酶K）作为对照。测量EV处理对细胞计数、生存率、凋亡、衰老、迁移和线粒体含量的影响。与对照-EVs相比，CCA-EV处理使细胞计数降低了18%，细胞生存率降低了6%。CCA-EVs增加了凋亡特征的发生率：DNA片段化增加了13%，Annexin V+/PI+细胞增加了21%，促凋亡蛋白Bax的表达增加了25%以及Bax/Bcl-2比率增加了60%。CCA-EVs使衰老细胞数量增加了29%，衰老标记物HMGB1增加了49%，p16增加了92%。当CCA-EVs被Triton X-100（有或没有蛋白酶K）预处理时，凋亡和衰老的增加被消除，证实这一效应是由于完整的EVs导致的，并可能通过EV膜蛋白实现。CCA-EVs对细胞迁移和线粒体含量没有任何影响。该研究首次展示了CCA诱导的骨骼肌EVs在介导与慢性锻炼传统相关的抗肿瘤效应方面的潜力。