MDM2最末端外显子八外显子跳跃事件中的保守序列元素揭示了由远程调控元件控制的替代剪接‘盒子调控‘模型

现代测序技术揭示癌症表现出广泛的替代剪接失调，这在驱动肿瘤特征中发挥着重要作用。替代剪接使一个基因能够生成多种mRNA变体，这是塑造正常细胞以及癌细胞独特特征的基本机制。这些剪接事件是由顺式和反式作用因子之间复杂的相互作用控制的，理解这些机制对于有效靶向癌细胞至关重要。本研究强调了一种独特的剪接事件，其中基因毒性应激诱导原癌基因MDM2的八个外显子跳跃，导致MDM2-ALT1的形成，这是一种在多种癌症中高表达的同种型。为了有效靶向这一剪接事件，了解其背后的调控机制非常重要。我们假设该事件要么通过单个外显子的自主调控（外显子自主模型），其中每个外显子独立调控，要么通过协调排除八外显子调控单元（外显子调控模型）发生。利用计算工具、全面的模块化迷你基因系统、CRISPR突变细胞系和小鼠模型，我们证明这一复杂的MDM2剪接事件是由远端终端外显子中的序列调控的，这些序列作为关键调控因子，组织MDM2的替代剪接。通过突变第11外显子上的Srsf2结合位点，获得了Mdm2-MS2同种型（人类MDM2-ALT1剪接变体的小鼠同源物）的组成性表达，调节了NIH3T3细胞中的增殖和凋亡动态。此外，在p53野生型的体内环境中，该同种型对年龄相关的肿瘤形成具有保护作用。我们的研究结果支持MDM2剪接的外显子调控模型，由类似于控制转录的远程增强子元素调节。这些发现揭示了剪接代码中的复杂性，可能对开发靶向剪接变体的癌症治疗产生重要影响。