Boule是缺失于无精症(DAZ)家族的祖先成员,对于大多数动物的配子发生和男性生育至关重要。然而,关于软体动物Boule的信息稀缺。在这里,我们从Pomacea canaliculata的基因组中鉴定了一个对应物(Pcbol),它已成为一种全球分布的外来物种,是对水生生物多样性、淡水生态系统及入侵区域作物生产造成严重破坏的臭名昭著的害虫。本研究旨在研究Pcbol在男性生殖中的生物学作用,并解码其通过双链RNA介导的RNA干扰(RNAi)调节的分子机制。生物信息学分析表明,Pcbol基因组序列长度为12,934 nt,拥有一个编码97个氨基酸残基的294 nt开放阅读框,并具有在软体动物同源物中保守的RRM结构域。时空表达谱分析表明,Pcbol在成年雄性和睾丸组织中的丰度占主导地位。以每蜗牛4 μg剂量注射dsPcbol 5天,qRT-PCR和西方印迹显示在Pcbol的转录和翻译水平上实现了最佳沉默。免疫荧光结果证实RNAi后Pcbol信号强度显著减少。除了生殖腺表型停滞,dsPcbol处理后精子细胞数量相较于dsGFP对照显著减少。在生化和生育性测试中,Pcbol缺失显著降低了Te/SP/Arg含量,并抑制了卵子沉积和孵化率。此外,CDC25/TSSK1/SPATA17/DDX4/Dmrt2/Sox2/Kelch10/SPO11等精子发生基因在Pcbol沉默后表现出明显下调,分子对接预测CDC25与Pcbol之间存在强亲和力。这些分子模块可能与Pcbol相互作用,以介导对精子发生功能障碍的干扰效果。综上所述,我们的研究不仅确认了Boule对于软体动物的精子发生和男性生育的不可或缺性,还强调了基于Pcbol的男性不育技术(MST),可纳入精准害虫管理(PPM)策略,以实现Pomacea canaliculata的可持续控制。
Gu等人(Mon,)研究了这个问题。