从委内瑞拉一名男子体内分离出的犬埃立克体样病原体：抗原和遗传特征分析

我们报告了南美洲首例人类埃立克体属物种的分离以及分子和抗原特征分析。本回顾性研究纳入了来自6名具有提示人类埃立克体病临床体征的儿童，以及43名与表现出符合犬埃立克体病临床体征的犬只有过密切接触的表观健康成人的血清标本。使用 Ehrlichia chaffeensis Arkansas、Ehrlichia canis Oklahoma 和 Ehrlichia muris 抗原通过间接免疫荧光抗体试验进行评估。两名表观健康个体的血清在间接免疫荧光抗体试验中对所有三种抗原均呈阳性。在这三种抗原中，来自受试者1和受试者2的样本分别对 E. chaffeensis 和 E. muris 表现出最高的抗体滴度。其余血清样本对所有三种抗原均呈阴性。一年后对受试者1的血液样本进行检查，在血涂片的单核细胞中发现了形态学上类似于 E. canis、E. chaffeensis 或 E. muris 的桑葚胚。该微生物在此被称为委内瑞拉人类埃立克体（Venezuelan human ehrlichia, VHE），在将分离出的血液白细胞与犬巨噬细胞系（DH82）共培养4天后从该受试者的血液中分离出来。在腹腔接种受试者1的血液白细胞10天后，该微生物也从小鼠体内分离出来。电镜分析显示，该人类分离株在超微结构上与 E. canis、E. chaffeensis 和 E. muris 相似。在比较 VHE 与 E. chaffeensis、E. canis 和 E. muris 对小鼠的毒力时，仅 VHE 和 E. muris 在腹腔接种后分别在第4天和第10天在 BALB/c 小鼠中诱发了临床体征。从该小鼠的腹膜渗出细胞中重新分离出了 VHE。仅感染 E. chaffeensis 和 E. muris 的小鼠出现了显著的脾肿大。Western 免疫印迹分析显示，受试者1的血清与 VHE 抗原的110、80、76、58、43、35和34 kDa的主要蛋白发生反应。抗 E. chaffeensis 的人血清与 VHE 抗原的58-、54-、52-和40-kDa蛋白发生强反应。抗 E. canis 犬血清与 VHE 的26-和24-kDa蛋白发生强反应。相比之下，抗 E. sennetsu 兔血清和抗 E. muris 小鼠血清未与 VHE 抗原发生反应。受试者1的血清与 E. chaffeensis、E. canis 和 E. muris 抗原的90、64或47 kDa主要蛋白发生反应。这种反应模式表明该血清样本与来自 Oklahoma 的 E. chaffeensis 感染人类患者的血清样本相似。VHE 的 16S rRNA 基因碱基序列与 E. canis Oklahoma 的亲缘关系最近。基于这些观察，我们认为 VHE 是 E. canis 的一个新毒株或亚种，可能会在人类中引起无症状的持续性感染。