发现一种高度特异性的抗甲氨蝶呤（MTX）DNA适配体用于抗体独立的MTX检测

高剂量的甲氨蝶呤（MTX）治疗用于治疗多种癌症，如白血病和淋巴瘤，同时，由于MTX的血液浓度过高，存在危及生命的副作用风险，因此必须仔细监测其浓度。目前，MTX浓度在临床环境中使用基于抗体的试剂盒进行测量；然而，抗体的异质性和批次间的变化可能影响检测限。在此，我们开发了可化学合成的均匀寡核苷酸的MTX检测系统。微珠辅助毛细管电泳（MACE）-SELEX针对MTX在三轮中成功鉴定出与抗MTX抗体具有相似特异性的MSmt7。MSmt7的3'端结合了类过氧化物酶的血红素-DNA酶构建了一个用于MTX传感的双功能寡核苷酸，其中在50%人血清中检测到的MTX的检测限（LoD）为118 nM。此外，通过滚动环扩增技术放大DNA酶区域显著提高了灵敏度，检测限为290 pM。提出的基于寡核苷酸的MTX检测系统将为实验室和临床提供可靠且成本更低的抗体独立的MTX检测铺平道路。