一个内含子 NF-kappaB 元件对于肿瘤坏死因子-alpha 和白细胞介素-1beta 诱导人锰超氧化物歧化酶基因是必需的

肿瘤坏死因子-alpha（TNF）和白细胞介素-1beta（IL-1）是细胞因子，通过激活对氧化还原敏感的转录因子核因子-kappaB（NF-kappaB）来诱导多种基因的表达。我们此前克隆了整个人 MnSOD（SOD2）基因，并在 5' 和 3' 侧翼区以及内含子区发现了数个 NF-kappaB 结合位点。为了检测这些推定的 NF-kappaB 结合位点是否能够对 TNF 和 IL-1 产生应答，我们使用连接至荧光素酶报告基因的各种缺失构建体进行了诱导分析。我们发现，含有数个 NF-kappaB 结合位点的 5' 和 3' 侧翼区并不介导 TNF 或 IL-1 对 MnSOD 的诱导。当将包含 NF-kappaB、C/EBP 和 NF-1 结合位点的 342-bp 内含子 2 片段连接至 SOD2 基因的基础启动子时，转录活性对 TNF 和 IL-1 的应答以方向和位置非依赖性方式显著增加。为了精确定位对增强子活性最关键的元件，对每个单独位点的缺失和特异性突变进行了研究。结果表明，NF-kappaB 结合位点对于 TNF 或 IL-1 介导的诱导是必需的，但并非充分的。此外，5' 和 3' 侧翼区的 NF-kappaB 元件在被转座至内含子片段时，可以在 TNF 或 IL-1 诱导中发挥功能。综上所述，这些结果表明，NF-kappaB 元件及其在 SOD2 基因中的位置对于 TNF/IL-1 介导的诱导至关重要。然而，实现高水平诱导需要 NF-kappaB 与其他转录元件之间复杂的相互作用。