反义标靶诱饵外显子可以减少内含子保留并增加人类红细胞母细胞中的蛋白质表达

诱饵外显子模型被提出用以调节涉及主要较大内含子（>1 kb）的内含子保留（IR）事件的一个子集。剪接报告研究表明，诱饵剪接位点对其活性至关重要，提示诱饵通过参与内含子末端剪接位点并与内含子切除所需的跨内含子相互作用竞争，从而发挥作用。诱饵模型预测，反义寡核苷酸可能能够阻碍内源性前mRNA中的诱饵剪接位点，从而减少IR并增加有效的基因表达。实际上，我们现在证明，针对O-GlcNAc转移酶（OGT）基因的诱饵5'剪接位点使内含子保留从约80%减少到约20%，伴随着剪接OGT RNA和OGT蛋白表达的增加。剩余的OGT IR对反义治疗具有抵抗力，可能由独立机制介导。相反，其他保留的内含子在很大程度上依赖于诱饵功能，因为对两个广泛表达的剪接因子进行诱饵5'剪接位点的反义靶向显著减少（SNRNP70）或几乎消除（SF3B1）IR，并且在编码红细胞特异性结构蛋白α-光谱蛋白（SPTA1）的转录本中也明显减少内含子保留。这些结果表明调节诱饵外显子功能可以显著改变IR，并暗示诱饵外显子的动态调控可能是细胞类型中后转录调节基因表达的一种机制。