物流介导的人工同域现象及其对Hylurgus ligniperda分子检测的影响

国际木材贸易加速了入侵红毛松树皮甲虫H. ligniperda的全球传播，对植物检疫检查和边境生物安全带来了持续挑战。快速等温扩增检测方法越来越多地在前线检疫环境中应用，以支持及时的监管决策。然而，在典型交易木材的异质生物背景下，其性能仍未得到充分评估，特别是针对低水平假阳性信号的实际影响。我们重新评估了一种以前报告的H. ligniperda等温检测方法，采用模拟木材运输和常规海关工作流程的条件。从检疫截留记录中选择的50种非目标节肢动物（主要是昆虫）被纳入，以代表可能在操作背景中共存的类群。来自Lema decempunctata的材料在重复实验中始终产生弱但可重复的扩增信号。Sanger测序排除了污染，确认了复杂生物基质中的低水平非目标扩增。尽管信号微弱，但检疫环境中的模糊结果可能触发货物扣留、确认实验室检测或临时贸易限制，从而增加检查工作负担，延迟清关并产生可避免的合规成本。这些发现表明，贸易介导的物种组合可能会损害检测性能，超出传统分类学基础特异性测试的预期。为了减少解释不确定性和相关监管负担，我们提出了一种分层诊断工作流程，将快速现场等温筛查与特异性导向的SYBR Green qPCR确认结合起来。这一策略提高了诊断可靠性，同时保持了应用生物安全监测的操作效率。