RPA联用CRISPR/Cas12a快速、超灵敏检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）双基因

摘要：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）引起的感染日益严重，需要快速可靠的诊断方法。虽然现有的RPA-CRISPR/Cas12a平台在MRSA检测中表现出潜力，但大多数依赖单基因靶标或需要多个Cas酶。在这里，我们开发了一种新型的双基因检测策略，可以在一次RPA-CRISPR/Cas12a反应中同时检测S. aureus特异性femA基因和耐甲氧西林的mecA基因。这种综合方法能够在短短30分钟内清晰地区分MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA），结果通过荧光和侧流条显现。该检测显示出高特异性（与常见病原体无交叉反应）和10拷贝/μL的灵敏度，与qPCR相当。与39个临床样本的验证显示抗菌药物敏感性测试的100%一致性。我们的双基因RPA-CRISPR/Cas12a平台在临床MRSA诊断中代表了一项重要的进步，提供了更高的准确性和操作简便性。