一种优化的鼠脑组织脂质滴可视化方法

摘要 脂质滴（LDs）是脂质存储细胞器，在神经退行性疾病中引起了关注，但其在大脑中的生理作用尚未完全了解。使用亲脂染料（如BODIPY 493/503（BD493））或针对LD外壳蛋白的抗体进行的经典LD检测通常在健康的大脑组织中显示出很少的LD。相反，我们最近开发的内源性LD报告小鼠在未染色的发育和成年大脑中显示出大量的LD。为了理解这种差异，我们检查了组织准备和洗涤剂如何影响LD检测。我们发现，BD493在脑组织中的表现不佳，而其他亲脂染料可以可视化许多LD。基于抗体的检测对组织预处理敏感，但可以显示出与LD报告小鼠相似的LD数量。我们在此提出了一种优化的方案，证明LD在健康的年轻和老年大脑中丰富，且老年小鼠中的LD较大。然而，在老年大脑中进行LD检测需要谨慎，因为存在强烈的LD样自发荧光。