人类血浆α2-巨球蛋白和冯·维尔布兰因子在具有相应ABO表型的受试者中具有共价连接的ABO(H)血型抗原

我们最近在从VIII因子浓缩液中纯化的人类冯·维尔布兰因子(vWF)的Asn连接糖链中识别出了ABO(H)血型结构 (J Biol Chem 267:8723, 1992)。我们通过Western blotting分析和夹心酶联免疫吸附试验，使用特定于血型的单克隆抗体(MoAbs)和凝集素，对带有ABO(H)血型抗原的血浆糖蛋白进行了调查。两种主要的血浆蛋白在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示出约180 Kd和270 Kd的表观分子量，它们分别与特定于血型的MoAbs和欧百里香凝集素I反应，这与供体的血型一致。蛋白质条带的直接测序分析表明，它们分别与α2-巨球蛋白(α2M)和vWF的N端序列相同。这两条带还与抗α2M和抗-vWF抗体反应。通过免疫沉淀从血浆中制备的α2M和vWF显示出适当的血型抗原性。与内糖苷酶F孵育后，α2M和vWF几乎完全失去了与抗血型试剂的反应性。约90%的血浆vWF被抗血型抗体免疫沉淀，然而只有约10%的α2M被沉淀。这些结果表明，在具有相应ABO表型的正常个体中，至少两种血浆糖蛋白vWF和α2M具有Asn连接的ABO(H)血型抗原。因此，在为治疗用途准备血浆材料时，应考虑血浆糖蛋白中的ABO(H)血型抗原。