钙蛋白酶-5的候选相互作用伙伴提示其参与新生血管炎症性玻璃体视网膜病的线索

尽管钙蛋白酶-5/CAPN5在哺乳动物中广泛表达，但对其功能知之甚少。CAPN5的致病突变是致使一种毁灭性自身免疫眼病——新生血管炎症性玻璃体视网膜病(NIV)的原因。为了深入了解CAPN5的生理和病理角色，识别候选相互作用伙伴和可能的底物是至关重要的。将全长催化缺失的(Cys81Ala) CAPN5-3×FLAG转染的人类SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞用于抗FLAG共免疫沉淀(co-IP)和使用所有理论质谱的序列窗口获取(SWATH-MS)的定量蛋白质组学。与转染空FLAG载体的细胞相比，51种蛋白质的丰度至少增加了四倍，p < 0.01。候选CAPN5相互作用伙伴中，24/51与蛋白质质量控制相关，包括分子伴侣、伴侣蛋白和泛素-蛋白酶体系统的组分。其他候选相互作用蛋白包括微管蛋白、激酶、磷酸酶、G蛋白和线粒体蛋白。通过共免疫沉淀和免疫印迹验证了14种候选蛋白的CAPN5相互作用。其中11种蛋白在与WT CAPN5-3×FLAG共同免疫沉淀后表现出体外钙诱导的蛋白水解。观察到致病性CAPN5变异体R243L和R289W对共免疫沉淀蛋白的钙诱导蛋白水解的损害。需要进一步研究以验证候选CAPN5相互作用体与SWATH-MS和共免疫沉淀结果所建议的蛋白质和复合物之间的关联，以及CAPN5在这些复合物中的可能角色。CAPN5在蛋白质质量控制中的可能参与与NIV相关，因为蛋白质质量控制缺陷被认为与遗传性视网膜疾病有关。蛋白质组学数据可通过ProteomeXchange获取，标识符为PXD068008。