利用KESTREL鉴定filamin C作为PKBα的新生理底物

我们在兔骨骼肌提取物中检测到一种迅速被PKBa（蛋白激酶Ba）磷酸化的蛋白质，但未被SGK1（血清和糖皮质激素诱导激酶1）磷酸化，并将其鉴定为细胞骨架蛋白FLNc（filamin C）。在体外研究中，PKBa在Ser2213位置对FLNc进行磷酸化，该位点位于FLNa和FLNb同种型中不存在的插入区。当C2C12幼肌细胞受到胰岛素或表皮生长因子的刺激时，Ser2213被磷酸化，并且在低浓度的wortmannin下被阻止，此时它是磷脂酰肌醇3激酶的相对特异性抑制剂。经典的MAPK（有丝分裂激活蛋白激酶）通路抑制剂PD 184352和/或mTOR（哺乳动物雷帕霉素靶蛋白）抑制剂雷帕霉素没有影响。胰岛素还诱导心肌中FLNc在Ser2213位点的磷酸化，但在不表达PDK1（3-磷酸肌醇依赖激酶1）的心肌中则未观察到磷酸化，PDK1是PKB的上游激活因子。这些结果鉴定出肌肉特异性同种型FLNc作为PKB的新生理底物。