小鼠巨噬细胞系中可诱导一氧化氮合酶的分子克隆和功能表达。

暴露于细胞因子和/或内毒素的激活巨噬细胞产生一氧化氮（NO.），这是一种自由基，是宿主对感染的反应介质。激活诱导一氧化氮合酶的表达，该酶催化L-精氨酸和分子氧形成NO.。我们报告从暴露于干扰素-γ和脂多糖的小鼠巨噬细胞系RAW264.7中克隆编码可诱导一氧化氮合酶的cDNA。注射来自该cDNA转录的mRNA的卵母细胞显示出依赖于精氨酸的亚硝酸盐生成，这是NO.的一个稳定代谢物。一氧化氮的生成被酶抑制剂NG-单甲基精氨酸阻断，并且不依赖于钙/钙调素。RAW264.7细胞在激活后快速积累编码一氧化氮合酶的mRNA。与先前纯化的钙/钙调素依赖性一氧化氮合酶（Bredt, D. S., and Synder, S.H. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 87, 682-685）和克隆（Bredt, D. S., Hwang, P. M., Glatt, C. E., Lowenstein, C., Reed, R. R., and Synder, S. H. (1991) nature 351, 714-718）的大鼠脑比较推断出的氨基酸序列表明，两个蛋白质的C末端半部分中存在共享的NADPH和黄素共因子结合位点，N末端附近还有一个额外的保守区域，可能识别L-精氨酸和/或有助于活性位点。