小鸡眼睛睫状神经营养因子的纯化

分离的8天鸡胚睫状神经节神经元在培养中如果不添加特定补充物，则连24小时也无法存活。其中一种补充物是称为睫状神经营养因子（CNTF）的蛋白质，它在含有体内与睫状神经节神经元相连的相同肌肉细胞的眼内组织中以非常高的浓度存在。我们在这里描述通过一个为期2天半的程序纯化小鸡眼睛CNTF，该程序涉及将眼内组织提取物依次通过DE52离子交换色谱、膜超滤浓缩、蔗糖密度梯度超离心和制备性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺梯度电泳处理。300只眼睛的组织水提取物将产生大约10-20微克生物活性、电泳纯净的CNTF，特定活性为7.5 X 10(6)营养单位/毫克蛋白质。经纯化的CNTF的相对分子质量为20,400道尔顿，等电点约为5，经过分析性凝胶电泳测定。除了支持睫状神经节神经元的存活外，纯化的CNTF还支持某些小鸡和啮齿动物的感觉和交感神经节培养神经元的24小时存活。CNTF与小鼠下颌神经生长因子（NGF）在分子量、等电点、无法被NGF抗体灭活、支持睫状神经节神经元体外存活的能力以及无法支持8天鸡胚背根神经节神经元的存活方面有所不同。因此，CNTF代表了第一个纯化的神经营养因子，针对副交感神经胆碱能神经元。