尽管亲和力相似,肌动蛋白与骨骼肌和红细胞肌球蛋白在不同的结合位点相互作用,表明亚型特异性功能角色。
肌动蛋白结合蛋白是一种与肌球蛋白结合的蛋白质,局限于条纹肌薄丝的尖端,并在体外封闭肌球蛋白-肌动蛋白丝的尖端。先前研究的结果表明,肌球蛋白-肌动蛋白结合的相互作用是特异于亚型的。为了研究肌球蛋白与肌动蛋白特异性相互作用的分子基础,我们分离了鸡骨骼肌肌动蛋白的cDNA。得出的肌肉肌动蛋白的氨基酸序列与人类红细胞肌动蛋白的序列具有86%的相似性,表明肌动蛋白是一种高保守的蛋白质。在鸡骨骼肌mRNA的北方印迹中观察到的多重mRNA可以通过cDNA的3'-非翻译区中的多个聚腺苷酸化信号来解释。使用固相结合测定法检测了125I标记的骨骼肌和红细胞肌球蛋白与细菌表达的肌肉肌动蛋白的结合。出乎意料的是,骨骼肌和红细胞肌球蛋白与肌肉肌动蛋白的结合亲和力相似(Kd值约为0.2 μM)。然而,使用红细胞和骨骼肌肌球蛋白的交叉竞争研究表明,它们与肌动蛋白结合于不同的位点。使用重组肌动蛋白片段进行的竞争研究来描绘这两种肌球蛋白的结合域,显示残基6-94包含骨骼肌肌球蛋白结合位点,而残基90-184包含红细胞肌球蛋白结合位点。肌动蛋白的不同区域与肌肉和非肌肉肌球蛋白的结合可能允许肌动蛋白与特定组织成分的相互作用,或可能影响肌动蛋白的封闭活性。
Babcock等人(星期二)研究了这个问题。