敏感且广泛反应的逆转录-PCR检测新型副黏病毒

我们开发了一组逆转录-PCR检测和识别临床标本中已知和新型副黏病毒的实验。引物是根据聚合酶pol基因序列的保守基序设计的，以检测副黏病毒亚科或肺病毒亚科的成员，或副黏病毒亚科内的属群。共识-退化混合寡核苷酸引物设计及半嵌套或嵌套PCR实验设计被用于增强各自实验的反应广度和灵敏度。利用表达的RNA和来自不同家族或属的病毒感染组织培养分离株的10倍稀释系列，这些实验在平均情况下能够检测到100到500拷贝的模板RNA。这些实验对各自的属群或亚科病毒具有特异性。这组引物增强了我们在未知病因的疫情和疾病中寻找新型病毒的能力。