新型喹唑啉–靛红杂化物对多激酶的抑制作用：设计、合成、生物学评价及机制研究

背景/目的：癌症是一项全球性的健康问题，也是第二大死因，几乎占死亡人数的六分之一。发现新型抗癌药物对药物化学家而言仍是一项挑战，进一步的研究将提高患者的生存几率。蛋白激酶是开发抗癌药物最受关注且最成功的生物靶点之一。在此背景下，本研究选择蛋白激酶作为靶点，并合成了一系列靛红–喹唑啉杂化物。方法：使用 MTT 检测法评估了它们对四种癌细胞系（HepG2、MCF-7、MDA-MB-231 和 HeLa）以及一种正常成纤维细胞系（WI38）的抗增殖活性。结果：所测试的化合物对四种癌细胞系表现出不同程度的细胞毒性作用。化合物 6c 对所有癌细胞均表现出最强的抗癌活性。此外，还测试了该化合物对抗凋亡蛋白 Bcl-2 以及促凋亡蛋白 Bax、caspase-3 和 caspase-9 表达的影响，结果显示其诱导凋亡的作用与 staurosporine 相似。此外，annexin V-FITC/PI 双染检测证实化合物 6c 通过凋亡诱导细胞死亡。流式细胞术分析显示，化合物 6c 在 HepG2 细胞系中诱导了 sub-G1 期和 S 期细胞周期阻滞。此外，发现化合物 6c 是一种多激酶抑制剂，对 CDK2、EGFR、VEGFR-2 和 HER2 具有强效抑制活性，IC50 值分别为 0.183 ± 0.01、0.083 ± 0.005、0.076 ± 0.004 和 0.138 ± 0.07 μM。最后，进行了分子对接模拟以预测其与 CDK2 活性位点可能存在的结合相互作用。结论：这些发现表明，化合物 6c 是一种有前景的多激酶抑制剂，具有强效抗癌活性，值得作为潜在治疗药物进行进一步研究。