应用抗义线核酸针对O6-甲基鸟嘌呤-脱氧核糖核酸甲基转移酶信使核糖核酸治疗恶性胶质瘤

目的：氯乙基亚硝脲衍生物1-(4-氨基-2-甲基-5-嘧啶基)甲基-3-(2-氯乙基)-3-亚硝脲（ACNU）是人类恶性脑肿瘤化疗的首选药物。然而，ACNU的细胞杀伤效应通过O6-甲基鸟嘌呤-脱氧核糖核酸甲基转移酶（MGMT）对ACNU介导的脱氧核糖核酸损伤的修复被有效抑制。由于多种人类肿瘤，包括脑肿瘤，含有高水平的MGMT活性，我们研究了与MGMT信使核糖核酸互补的抗义线核酸（RNA）对肿瘤细胞ACNU耐药性的影响。方法：我们从经过逐步增加浓度的ACNU处理的大鼠胶质瘤细胞系C6中建立了稳定的ACNU耐药克隆C6AR。我们在C6AR细胞中转染了一个编码抗义MGMT RNA的质粒脱氧核糖核酸，控制在人体金属硫蛋白启动子下，并通过集落形成效率测定抗义RNA对肿瘤细胞ACNU耐药性的影响。结果：C6AR细胞中MGMT信使RNA表达丰富，尽管在相同的测定条件下，母株C6细胞中的MGMT基因转录水平低于检测下限。转染基因依赖性抗义MGMT RNA的表达显著抑制了C6AR细胞的ACNU耐药性，并导致肿瘤细胞存活率降低。结论：大鼠胶质瘤细胞中MGMT表达导致的ACNU耐药性通过抗义MGMT RNA表达得到了显著克服。这一结果表明，抗义MGMT RNA系统可能是克服ACNU耐药性的一种有用策略，用于治疗顽固性恶性胶质瘤。