通过原代体外刺激肽类诱导细胞毒性T淋巴细胞。

通过对C57BL/6小鼠脾脏细胞进行适当的肽片段的原代体外刺激，可以生成抗原特异性细胞毒性T细胞。该反应无需之前的体内免疫。使用氰氨酸溴化物（CN OVA）或胰蛋白酶（T OVA）片段化的鸡卵白蛋白作为混合肽的来源。同时也使用了合成肽NP365-380，该肽代表来自流感病毒A/PR/8核蛋白的365-380序列，因为它包含了H-2b小鼠感染A/PR/8病毒后产生的CTL所识别的主要决定因子。原代体外的细胞毒性T细胞反应在肽特异性上是有效的，因为只有在适当的肽抗原存在时才会裂解靶细胞。天然OVA无法在体外诱导初级效应细胞，也无法使靶细胞对OVA消化特异性CTL敏感。与OVA序列中111-122残基对应的合成肽可以使靶细胞对针对T OVA诱导的效应细胞敏感。通过体外刺激生成的效应细胞为CD8+、CD4-，且对NP365-380和T OVA的识别受H-2Db限制。CN OVA特异性效应细胞也为CD8+、CD4-，但令人惊讶的是，它们能够以抗原特异性方式裂解一系列H-2不同的靶细胞。这些效应细胞未能裂解不表达I类MHC分子的肿瘤细胞系。这种广泛的MHC限制模式在克隆水平上也很明显。在所有情况下，经过原代体外刺激生成的抗肽CTL在裂解表达内源性抗原的靶细胞（如流感病毒感染的细胞或转染了OVA cDNA的细胞）方面效率较低。然而，针对NP365-380肽在体外生成的细胞毒性T细胞系确实包含了一小部分对病毒反应的细胞，这些细胞可以通过与A/PR/8感染的脾细胞刺激选择性扩增。将这些结果与在没有通过高表面密度肽/MHC复合物进行抗原处理的情况下的I类限制T细胞刺激进行讨论。