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N6-腺苷甲基化是mRNA及其前体的常见修饰，但对于反应机制或修饰功能知之甚少。为了解这些问题，我们开发了在HeLa细胞核提取物中检测N6-腺苷甲基转移酶活性的条件。将S-3H甲基-腺苷甲硫氨酸的甲基转移至不同核苷酸组成的无标记随机共聚合物RNA底物，揭示了与先前推导的共识序列一致的底物特异性，PuG > AACA/C/U。使用定义序列的32-P标记RNA底物来检查甲基化的最小序列要求。每个RNA长20个核苷酸，包含核心共识序列GGACU或该序列的某种变体。含有GGACU的RNA，无论是单拷贝还是多拷贝，都是良好的甲基化底物，而在GGACU序列中含有单碱基替换的RNA则显著降低甲基化。这些结果表明，N6-腺苷甲基转移酶具有严格的序列特异性，并且甲基化不需要扩展序列或二级结构。识别该序列不需要RNA成分，因为微球菌核酸酶预处理核提取物实际上提高了甲基化效率.
Harper等（Mon，）研究了这个问题.
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